期刊简介
1980年创刊。中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会主管。中华医学会、天津市环湖医院、华北理工大学主办。办刊宗旨：面向临床，突出综合，讲究实用；使临床医师了解医学各学科进展，解决在临床工作中遇到的具体问题。栏目设置：论著、综述。收录范围：重点报道内、外、妇、儿科医学进展。
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首页>中国综合临床杂志
- 杂志名称：中国综合临床杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会、天津市环湖医院、华北理工大学
- 国际刊号：1008-6315
- 国内刊号：12-1361/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科技核心期刊期刊收录：知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
慢病毒介导的小RNA干扰组织蛋白酶B转染小鼠脑微血管内皮细胞的条件
周国宏；孔丽
关键词：RNA干扰, 慢病毒, 组织蛋白酶B, 小鼠脑微血管内皮细胞, 转染率
摘要：目的 研究慢病毒介导下小RNA干扰组织蛋白酶B转染小鼠脑微血管内皮细胞( bEND.3)的佳条件.方法 实验分3组,完全培养基组(NP组)、培养基±5 mg/L凝聚胺组(P1组)和培养基+8 mg/L凝聚胺组(P2组),每组均有5个不同梯度的转染复数(MOI),即1、5、10、15、20,每个MOI值设3个孔,共45组.转染48、72、96 h分别在荧光显微镜下计数绿色荧光蛋白,并求其转染率,从而得到其佳MOI值；1周后采用MTT法检测佳MOI值对bEND.3活性和存活率的影响.结果 转染48 h时,在各组观察到少量绿色荧光蛋白,其转染率介于1％ ～9％；72 h和96 h时,MOI相同的各组间差异无统计学意义(P＞0.01),其中,MOI为1、5、15的各组转染率均低于20％；MOI为10和20组,转染率介于71％～97％与60％～ 84％,且MOI为10组转染率高于MOI为20组,差异有统计学意义(P＜0.01).MTT检测P1组和P2组存活率,1周时分别为(81.38 ±6.69)％、(62.03±5.13)％,P1组显著高于P2组(t=15.795,P＜0.001).结论 慢病毒介导的小RNA干扰组织蛋白酶B转染bEND.3佳优化条件为MOI=10,凝聚胺为5 mg/L,佳转染时间为转染后72 h.
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