期刊简介

               1980年创刊。中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会主管。中华医学会、天津市环湖医院、华北理工大学主办。办刊宗旨：面向临床，突出综合，讲究实用；使临床医师了解医学各学科进展，解决在临床工作中遇到的具体问题。栏目设置：论著、综述。收录范围：重点报道内、外、妇、儿科医学进展。                

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  • 杂志名称：中国综合临床杂志
  • 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位：中华医学会、天津市环湖医院、华北理工大学
  • 国际刊号：1008-6315
  • 国内刊号：12-1361/R
  • 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科技核心期刊期刊收录：知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
中国综合临床杂志2017年第07期

白细胞介素12联合粒细胞巨噬细胞集落刺激因子对H22肝癌细胞凋亡的影响

柳思琪；张倩；邵雪；贾胜男；马静婷；潘留兰

关键词：肝癌细胞, 巨噬细胞集落刺激因子, 白细胞介素12, 细胞凋亡
摘要：目的 研究基因粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和IL-12基因联合作用对H22肝癌细胞凋亡的影响.方法 体外培养肝癌细胞株,分别设置GM-CSF转染组、IL-12转染组、GM-CSF和IL-12共染组、阴性对照组(空载组).构建PIB-CMV3-GM-CSF和PIB-CMV3-IL-12真核表达载体,转染肝癌细胞36 h后,采用荧光显微镜检测转染效果;RT-PCR 检测IL-12、GM-CSF、p53、p38及(C-JUN mRNA表达水平;Western blot 法检测IL-12、GM-CSF、p53、p38及C-JUN蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 经荧光显微镜观察发现,转染GM-CSF组、转染IL-12组及共转染组均有较强的绿色荧光,说明质粒成功转入细胞.另外,空载组、GM-CSF转染组、IL-12转染组、GM-CSF和IL-12基因联合组p53 mRNA的表达量分别为1.2±0.10、4.3±0.98、4.2±0.34、9.2±0.87,蛋白表达量分别为1.0±0.10、3.6±0.34、3.8±0.30、5.0±0.60,与空载组比较,3组质粒转染组p53 mRNA和蛋白表达量均显著上调(P均<0.01);而与转染GM-CSF组、转染IL-12组比较发现,联合组能更加明显上调p53 mRNA和蛋白的表达量(P均<0.01).与此同时,空载组、GM-CSF转染组、IL-12转染组、GM-CSF和IL-12基因联合组p38 mRNA表达量分别为7.5±0.9、3.5±0.45、3.7±0.25、1.0±0.11,p38 蛋白表达量分别为10.1±1.03、6.1±0.67、7.1±0.61、1.0±0.12,C-JUN mRNA分别为11.2±1.20、4.1±0.19、3.3±0.30、1.0±0.01,C-JUN 蛋白分别为2.25±0.2、1.8±0.13、1.4±0.12、1.0±0.09,与空载组相比,3组质粒转染组p38 和C-JUN mRNA和蛋白的表达量均显著下调(P均<0.01);与转染GM-CSF组、转染IL-12组比较发现,联合组能更加明显的下调p38和C-JUN mRNA和蛋白的表达量(P均<0.01).流式细胞术检测结果显示,空载组、GM-CSF转染组、IL-12转染组、GM-CSF和IL-12基因联合组细胞早期凋亡率分别为(3.43±0.9)%、(5.87±1.02)%、(7.32±1.1)%、(17.47±2.11)%,与空载组比较,3组质粒转染组细胞早期凋亡率均显著的上调(P均<0.01);并且基因联合组细胞早期凋亡率与其他质粒组相比上调趋势更加明显(P均<0.01).结论 GM-CSF和IL-12基因联合作用可显著促进肝癌细胞凋亡,其作用机制可能是通过上调p53的表达、抑制p38和C-JUN的表达,进而促进肝癌细胞凋亡.

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